Пробирки должны заполняться на ± 10%от указанного на этикетке объема(метка объема нанесена на этикетку пробирки).
Гематологическому исследованию на лейкоз подвергают животных, в сыворотках крови которых серологическими методами (РИД, ИФА) обнаружены специфические антитела к вирусу лейкоза. Метод заключается в подсчете количества лейкоцитов в единице объема крови (1 мкл) и качественной оценке лимфоидных элементов- лимфоцитов.
Кровь для гематологического исследования берут из яремной вены в фабричные пробирки с антикоагулянтом ЭДТА (ЭДТА– динатриевая соль этилендиаминтетрауксусной кислоты) из расчета 0,1 мл. на 1 мл.крови. Для предотвращения свертывания крови содержимое пробирки сразу же тщательно перемешивают. Во время отбора проб крови животных не кормят, уборку помещений не проводят.
Для обеспечения качественного результата исследований нужно четко контролировать время и условия хранения проб до выполнения анализа. Стабилизированную кровь до исследования хранят в холодильнике при температуре 2-4 °С и исследуют не позднее, чем через 36 часов с момента взятия. Пробы крови нельзя замораживать, нельзя встряхивать (при транспортировке), нельзя долго хранить. Так как из-за продолжительного хранения изменяются некоторые характеристики форменных элементов крови (сопротивляемость клеточной мембраны), снижается объем лейкоцитов, повышается объем эритроцитов, что в конечном итоге приводит к ошибочным результатам измерения и неправильной интерпретации результатов.
Так как результат исследования оценивается согласно «Лейкозного ключа» с учетом возраста животных, при взятии крови и оформлении сопроводительного документа нужно обязательно указывать возраст животных кровь которых направляется в лабораторию для гематологического исследования.
Гематологическому исследованию на лейкоз подвергают животных, в сыворотках крови которых серологическими методами (РИД, ИФА) обнаружены специфические антитела к вирусу лейкоза. Метод заключается в подсчете количества лейкоцитов в единице объема крови (1 мкл) и качественной оценке лимфоидных элементов- лимфоцитов.
Кровь для гематологического исследования берут из яремной вены в фабричные пробирки с антикоагулянтом ЭДТА (ЭДТА– динатриевая соль этилендиаминтетрауксусной кислоты) из расчета 0,1 мл. на 1 мл.крови. Для предотвращения свертывания крови содержимое пробирки сразу же тщательно перемешивают. Во время отбора проб крови животных не кормят, уборку помещений не проводят.
Для обеспечения качественного результата исследований нужно четко контролировать время и условия хранения проб до выполнения анализа. Стабилизированную кровь до исследования хранят в холодильнике при температуре 2-4 °С и исследуют не позднее, чем через 36 часов с момента взятия. Пробы крови нельзя замораживать, нельзя встряхивать (при транспортировке), нельзя долго хранить. Так как из-за продолжительного хранения изменяются некоторые характеристики форменных элементов крови (сопротивляемость клеточной мембраны), снижается объем лейкоцитов, повышается объем эритроцитов, что в конечном итоге приводит к ошибочным результатам измерения и неправильной интерпретации результатов.
Для предотвращения свертывания крови содержимое пробирки сразу же тщательно перемешивают. Во время отбора проб крови животных не кормят, уборку помещений не проводят. Так как результат исследования оценивается согласно «Лейкозного ключа» с учетом возраста животных, при взятии крови и оформлении сопроводительного документа нужно обязательно указывать возраст животных кровь которых направляется в лабораторию для гематологического исследования.
Пробы крови должны быть исследованы не позднее 36 часов с момента взятия. При гематологическом исследовании осуществляют
- подсчет количества лейкоцитов при помощи электронного счетчика, камер
Горяева. - дифференцированный подсчет лейкоцитов в мазках (выведение лейкоформулы).
При подсчете лейкоцитов необходимо обращать внимание на точность взятия определенного объема крови и разбавления ее, зарядки камеры и подсчета клеток. Дифференцированный подсчет лейкоцитов (выведение лейкоцитарной формулы) проводят при обнаружении повышенного количества их. Для этих целей готовят мазки крови.
Мазки готовят на чистых обезжиренных предметных стеклах с ровной поверхностью, без царапин и шероховатостей.
Мазки готовят из нативной или стабилизированной крови (предварительно перемешанной). Для предотвращения возможного травмирование клеток крови предметные стекла подогреть до температуры тела. В левую руку берут предметное стекло между большим и указательным пальцем за короткие грани. Каплю, крови наносят на правый конец стекла. Шлифовальное стекло ставят вперед капли крови, надвигают до прикосновения с ней и равномерным движением влево делают мазок. Хорошо приготовленный мазок должен быть тонким, ровным и при просмотре на свет отливать цветами радуги.
В правильно окрашенном мазке ядра клеток приобретают красно — фиолетовый цвет цитоплазма лимфоцитов-голубой, а цитоплазма нейтрофилов — розовый. Лейкоцитарную формулу выводят по результатам дифференцированного подсчета 100 клеток в окрашенных мазках крови под микроскопом с иммерсионной системой. Количество отдельных элементов крови в лейкоцитарной формуле выражают процентах.
Для подсчета абсолютного количества лимфоцитов в пробе крови, относительное содержание (в %), определяемое по лейкоцитарной формуле, умножают на показатель абсолютного количества лейкоцитов в 1 мкл крови, и полученное произведение делят в 100. Показатель абсолютного количества лимфоцитов оценивают затем по «лейкозному.